설명:

펩타이드 매핑을 사용하면 단백질 또는 항체의 기본 구조에 미묘한 변화가 나타나고 단백질의 활동이나 결합 친밀성에 영향을 줄 수 있습니다.LC-MS/MS에 의한 펩타이드 매핑은 단백질이나 항체의 1차 염기서열을 확인하는 가장 강력한 질적 검사 중 하나입니다.이 서비스는 동일한 단백질, 항체 또는 바이오시밀러의 다른 롯을 비교하는 데 사용할 수 있습니다.

LC-MS/MS로 펩타이드 매핑 분석 서비스 다음을 포함합니다.

• 관심 있는 항체/프로테인은 LysC 또는 트립신과 같은 단백질 분해 효소로 분화, 감소 및 소화됩니다.
• 선택적: 두 번째 단백질 분해 효소가 단백질의 염기서열 포장을 증가시키기 위해 사용됩니다.
• 생성된 펩타이드 혼합물은 역단계 HPLC에서 분리됩니다. UV 흡수성의 염색체는 UV 214 nm에서 생성됩니다.
• HPLC 분리 후, 더 이상의 분석은 고해상도 질량 분광학 (Thermo Fisher Orbitrap Velos 또는 Fusion) 으로 수행됩니다.
• 단백질의 펩타이드 지도는 레퍼런스 단백질과 비교하기 위해 생성됩니다.
• 피크가 1차 순서대로 분석됩니다.
• 선택적 (두 개 이상의 샘플): 단백질 간의 롯별 변이를 평가하거나 바이오시밀러를 비교하기 위해 비교성 평가가 수행됩니다.

전달할 수 있는 정보:

• 1차 염기서열의 확인 (질서서열 포위율: 한 효소를 사용하여 60-90%; 두 개 이상의 효소를 사용하여 > 98%).
• N-bound oligosaccharides의 glycoprofiling (glycoforms의 이질성과 위치 점유의 근사)
• PTM의 식별 및 대략적인 정량화, 예를 들어 deamidation, 산화,N-항 피로글루타마트 형성과 C-항 리스 처리 (변화된 아미노산 위치와 % 변형을 감지 할 수 있습니다).
• 서로 다른 롯데의 유사성 평가
• 바이오시밀러의 비교성 평가

샘플 처리: 분화, 환원/알킬화 및 효소 소화, LC-MS 또는 LC-MS/MS.